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技术成果库
项目简介： 本发明提供了一种适用于酵母基因组改造的CRISPR/CAS9系统。
基本信息 | 本发明公开了 CRISPR/Cas9 介导的大片段 DNA 拼接方法。具体而言，本发明提供能在酵母中组成型表达 Cas9 的核酸构建物，该核酸构建物含有与 cas9 基因操作性连接的酵母 Tef1 启动子，来自 pBR322 的复制起始位点及其筛选标记和来源于 CEN6 ARS4 的复制区及其筛选标记，所述核酸构建物在酵母中为单拷贝复制，在大肠杆菌中为高拷贝复制。本发明还提供能在酵母中组成型表达 sgRNA 的核酸构建物、作为受体载体使用的核酸构建物以及 DNA 拼接方法。利用本发明可将两个以上待拼接大DNA 片段直接在酵母菌中一次成功拼接为大质粒，省去了低效率的大片段 DNA 的体外酶切回收及遗传转化等操作，比传统方法更方便高效。 |
成熟产品或解决方案 | 小试阶段 |
是否申请专利，有哪些 | 专利申请目前实质审查中，尚未授权。 |
拟转让对象 | 微生物发酵、医药、食品、保健品、工业酶、化工领域的企业 |
资金需求 | 面议 |
可出让的股份比例 | 面议 |
是否已转化 | - |
附件 | 无 |